有哪些方法可以提高ELISA實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性?
以下是提高ELISA實(shí)驗(yàn)重復(fù)性的關(guān)鍵方法,天正信達(dá)結(jié)合操作優(yōu)化和質(zhì)控要點(diǎn):
一、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程
移液一致性
使用校準(zhǔn)后的多通道移液器,采用吸頭預(yù)潤(rùn)濕技術(shù)減少氣泡,確保加樣體積和速度一致。
洗板控制
優(yōu)先使用洗板機(jī)保證每孔洗滌均勻,手工洗板時(shí)需控制力度和時(shí)間,避免孔間污染。
孵育條件
覆蓋板蓋減少邊緣效應(yīng),確保孵育溫度和時(shí)間嚴(yán)格統(tǒng)一(如37℃±0.5℃)。
二、試劑與樣本處理
試劑平衡與保存
所有試劑使用前需平衡至室溫,避免反復(fù)凍融,不同批次試劑不可混用。
樣本制備
避免溶血或高脂樣本,凍融樣本需充分混勻,渾濁樣本需離心后檢測(cè)。
三、質(zhì)控與驗(yàn)證
復(fù)孔檢測(cè)
設(shè)置復(fù)孔計(jì)算平均值,批內(nèi)CV應(yīng)<10%,批間CV<15%。
對(duì)照設(shè)置
每板需包含陰陽(yáng)性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線(R²≥0.99),異常值需排查操作誤差。
四、環(huán)境與設(shè)備管理
溫控校準(zhǔn)
維持環(huán)境溫度18-25℃,定期校準(zhǔn)水浴箱和酶標(biāo)儀。
避免干擾
顯色時(shí)避光操作,封板膜不可重復(fù)使用,邊緣孔可增加空白孔緩沖。
通過(guò)上述措施可顯著降低CV值,提升實(shí)驗(yàn)精密度。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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